Category: Biology Second Paper

১। মানুষের দেহ থেকে EPO জিন পৃথক করা হয়।

২। EPO জিনকে প্লাজমিডের সাথে যুক্ত করে রিকম্বিনেন্ট DNA তৈরী করা হয়।

৩। রিকম্বিনেন্ট DNA-কে পোষক কোষে প্রবেশ করানো হয়।

৪। রিকম্বিনেন্ট DNA-সহ পোষককে আবাদ মাধ্যমে জন্মানো হয়।

৫। পোষক থেকে EPO পৃথক করে ওষুধ তৈরী করা হয়। কিডনী রোগীকে ইনজেকশনের মাধ্যমে EPO পুশ করলে রক্তশুন্যতা দূর হয়।

ইরিথ্রোপোইটিন হলো একধরনের হরমোন। ইহা কিডনী থেকে উৎপন্ন হয়ে হাড়ের বোনম্যারো (bone marrow) কোষে প্রবেশ করে। বোনম্যারো কোষকে লোহিত রক্তকণিকা উৎপাদনে সাহায্য করে। ইরিথ্রোপোইটিন হরমোনের অভাবে রোগী রক্তশুন্যতায় ভোগে।

১। মানুষের কোষ থেকে TPA জিন এর mRNA সজঘঅ পৃথক করা হয়েছে।

২। mRNA থেকে cDNA তৈরী করা হয়।

৩। cDNA–কে প্লাজমিডের সাথে যুক্ত করে রিকম্বিনেন্ট DNA তৈরী করা হয়।

৪। রিকম্বিনেন্ট DNA–কে পোষক কোষে প্রবেশ করানো হয়।

৫। রিকম্বিনেন্ট DNA সহ পোষককে আবাদ মাধ্যমে কালচার করে হাজার হাজার কপি তৈরী করা হয়।

৬। পোষক থেকে TPA প্রোটিন পৃথক করে ওষুধ তৈরী করা হয়।

৭। হার্ট অ্যাটাক বা স্ট্রোক রোগীর রক্ত নালিতে TPA ইনজেকশন পুশ করলে রক্তের ব্লক বিগলিত হয়ে যায় এবং রোগী সুস্থ হয়ে ওঠে।

মানুষের রক্তে প্লাজমিন এনজাইম থাকে। প্লাজমিন এনজাইম রক্তে প্লাজমিনোজেন অবস্থায় বিরাজ করে। প্লাজমিনোজেন নিষ্ক্রিয় অবস্থায় থাকে। TPA ঞচঅ নিষ্ক্রিয় প্লাজমিনোজেনকে সক্রিয় প্লাজমিনোজেনে পরিনত করে। সক্রিয় প্লাজমিনোজেন মানুষের দেহে জমাট বাঁধা রক্তকে গলিয়ে দেয়। জমাট বাঁধা রক্ত গলানোর প্রক্রিয়াকে ফাইব্রিনোলাইসিস (Fibrinolysis) বলে। হার্ট অ্যাটাক অথবা স্ট্রোক হতে মানুষকে রক্ষা করে। রক্তের ব্লক বিগলিত করে রোগীকে সুস্থ করে। ১৯৭০ সালে ব্যাকটেরিয়া থেকে স্ট্রেপ্টোকাইনেজ (Streptokinase) এনজাইম পৃথক করা হয় যা জমাট বাঁধা রক্তকে গলিয়ে দেয়।

দুর্বল, অর্ধমৃত ও মৃত অণুজীবের সাসপেনশন দ্বারা তৈরী এক ধরনের অণুবীজ যা প্রয়োগ করে একই ধরনের অণুজীবের আক্রমণ প্রতিরোধ করা হয় তাকে ভ্যাক্সিন বা টিকা বলে। এডওয়ার্ড জেনার গুটি বসন্তের এবং লুই পাস্তুর জলাতঙ্কের টিকা আবিষ্কার করেন। ইহা চার প্রকার। Live vaccine, Killed vaccine, Toxoid vaccine  ও জাত ভিত্তিক ভ্যাক্সিন।

১। ইহা ভাইরাসের সংখ্যা বৃদ্ধি রোহিত করে।

২। ইহা অনাক্রম্যতন্ত্রকে নিয়ন্ত্রণ করে।

৩। | B ও T লিল্ফোসাইটের সংখ্যা বৃদ্ধি রোধ করে। ভাইরাসজনিত রোগ নিরাময় করে।

৪। Natural Killer Cell এর ক্ষমতা ও সংখ্যা বৃদ্ধির মাধ্যমে ক্যান্সার কোষের সংখ্যা বৃদ্ধিতে বাধা দেয়।

৫। পোষকের অনাক্রম্যতা বাড়িয়ে ক্যান্সার কোষকে ধ্বংস করে।

৬। ইহা অ্যান্টিবডি উৎপাদনে বাঁধা দেয়। সহজাত জারণকোষের ক্ষমতা ও বংশবৃদ্ধি ঘটায়।

৭। জটিল হেপাটাইটিস–বি, হার্পিস, প্যাপিলোমা প্রভৃতি চিকিৎসায় ইন্টারফেরন ব্যবহার হয়।

৮। জলাতঙ্ক রোগের র‌্যাবিস ভাইরাসের বিরুদ্ধে ইহা কার্যকরী।

১।  টার্গেট জিন নির্বাচন ও পৃথকীকরণঃ মানুষের ফাইব্রোব্লাস্ট কোষ থেকে DNA সংগ্রহ করা হয়। DNA থেকে ইন্টারফেরন কোড বহনকারী জিন (ইন্টারফেরন–বিটা) পৃথক করা হয়।

২। বাহক নির্বাচনঃ টার্গেট জিন বহন করার জন্য বাহক নির্বাচন করা হয়। প্লাজমিড DNA বাহক হিসেবে কাজ করে।

৩। প্লাজমিড DNA কে নির্দিষ্ট স্থানে কর্তনঃ রেস্ট্রিকশন এনজাইম প্রয়োগ করে বাহক প্লাজমিড DNA হতে নির্দিষ্ট অংশ কেটে ফেলা হয়।

৪। রিকম্বিন্যান্ট DNA তৈরীঃ লাইগেজ এনজাইম দ্বারা ইন্টারফেরন জিনকে বাহক প্লাজমিড DNA এর সাথে সংযুক্ত করে দেয়া হয়। ফলে রিকম্বিন্যান্ট DNA তৈরী হয়ে যায়।

৫।  রিকম্বিন্যান্ট DNA কে পোষক দেহে প্রবেশ করানোঃ রিকম্বিন্যান্ট DNA–কে পোষক E. coli ব্যাকটেরিয়ার কোষে প্রবেশ করানো হয়। ব্যাকটেরিয়ার কোষে রিকম্বিন্যান্ট DNA প্রবেশ করানোর প্রক্রিয়াকে ট্রান্সফরমেশন বলে।

৬। রিকম্বিন্যান্ট DNA এর সংখ্যা বৃদ্ধিঃ রিকম্বিন্যান্ট DNA–কে পোষক কোষে প্রবেশ করানোর পর পোষক ব্যাকটেরিয়াকে কালচার মিডিয়ামে আবাদ করা হয়। অল্প সময়ের মধ্যে কালচার মিডিয়ামে ব্যাকটেরিয়া সংখ্যা বৃদ্ধি করে হাজার হাজার কপি তৈরী করে। সেই সঙ্গে রিকম্বিন্যান্ট DNA তৈরী হয়। এসময় ব্যাকটেরিয়া আবাদ মাধ্যমে ইন্টারফেরন নিঃসৃত করে।

৭। ইন্টারফেরন পৃথকীকরণঃ আবাদ মাধ্যম থেকে ইন্টারফেরন পৃথক করা হয়। এরপর রাসায়নিক উপায়ে বিশুদ্ধ করা হয়।

প্রতিটি ঈস্ট কোষে এক মিলিয়ন (১০ লক্ষ) অণু ইন্টারফেরন তৈরী হয়। E. coli–এর ভিতরে 1×10⁵ অণু ইন্টারফেরন তৈরী হয়।

ইন্টারফেরন হলো উচ্চ আণবিক ওজন বিশিষ্ট প্রোটিন। প্রোটিনের ক্ষুদ্র ক্ষুদ্র গ্রæপ যার আণবিক ওজন ২০,০০০–৩০,০০০ ডাল্টন তাকে ইন্টারফেরন বলে। ইহা হলো প্রতিরক্ষামূলক প্রোটিন। E. coli ও ঈস্ট হতে ইন্টারফেরন উৎপাদন করা হয়। ইন্টারফেরনের বাণিজ্যিক নাম হলো বিটাফেরন (Betaferon)। ইহা তিন প্রকার। α–ইন্টারফেরন   β–ইন্টারফেরন ও γ–ইন্টারফেরন।

১৯৫৭ সালে ব্রিটিশ বিজ্ঞানী অ্যালিক ইসাক (Alick Isaacs) এবং জেন লিন্ডারম্যান  (Jean Lindermann) ইন্টারফেরন আবিষ্কার করেন। ১৯৮০ সালে আমেরিকান বিজ্ঞানী গিলবার্ট এবং ওয়াইজম্যান (Gilbert & Weissmann) মানব ইন্টারফেরন উৎপাদনে সক্ষম হন।

১। পলিনিউক্লিওটাইড শৃঙ্খল সংশ্লেষণঃ  ইনসুলিন অণু দুইটি পলিনিউক্লিওটাইড শৃঙ্খল দ্বারা গঠিত। A শৃঙ্খল এবং B শৃঙ্খল। A শৃঙ্খল ২১টি এবং B শৃঙ্খল ৩০টি অ্যামাইনো এসিড দ্বারা গঠিত। পরীক্ষাগারে রাসায়নিক উপায়ে ৬৩টি নিউক্লিওটাইড দ্বারা A শৃঙ্খল এবং ৯০টি নিউক্লিওটাইড দ্বারা B শৃঙ্খল তৈরী করা হয়। এরপর শৃঙ্খল দু’টি বিশুদ্ধ করা হয়।

২। রিকম্বিন্যান্ট DNA তৈরীঃ  বাহক ব্যাকটেরিয়া নির্বাচন করা হয়। ব্যাকটেরিয়া কোষ হতে প্লাজমিড DNA পৃথক করা হয়। রেস্ট্রিকশন এনজাইম প্রয়োগ করে A শৃঙ্খল ও B শৃঙ্খল হতে নির্দিষ্ট অংশ কর্তন করা হয়। আবার, একই এনজাইম প্রয়োগ করে প্লাজমিড DNA হতেও অনুরুপ অংশ কেটে ফেলা হয়। তবে প্লাজমিড DNA হতে এমন অংশটি কাটা হয়, যে অংশের জিন β গ্যালাক্টোসাইডেজ এনজাইম উৎপন্ন করে। এরপর লাইগেজ এনজাইমের সাহায্যে  A শৃঙ্খল ও B শৃঙ্খল পৃথক পৃথক প্লাজমিড DNA এর সাথে সংযুক্ত করে দেয়া হয়। A শৃঙ্খল ও B শৃঙ্খল প্লাজমিড DNA এর সাথে সংযুক্তকরণের ফলে রিকম্বিন্যান্ট DNA তৈরী হয়ে যায়। এভাবে দুই ধরনের রিকম্বিন্যান্ট DNA তৈরী হয়। A শৃঙ্খল রিকম্বিন্যান্ট DNA এবং B শৃঙ্খল রিকম্বিন্যান্ট DNA।

৩। পোষক দেহে রিকম্বিন্যান্ট DNA প্রবেশ করানোঃ রিকম্বিন্যান্ট DNA-কে ট্রান্সফরমেশন প্রক্রিয়ায় পোষক ব্যাকটেরিয়ার কোষে প্রবেশ করানো হয়। এটি হিট-শক মেথড বা ইলেকট্রিক পালস্ মেথডে করা হয়। পোষককে (E. coli) প্রথমে CaCl₂ দ্রবণে এবং পরে ১৪-১৬ ঘন্টা বরফে রাখা হয়। এতে পোষকের কোষপ্রাচীরে Ca লেগে থাকে। একটি পাত্রে পোষক ও রিকম্বিন্যান্ট DNA-এর মিশ্রণ ৩০ মিনিট বরফে, ৯০ সেকেন্ড ৪২০ সে তাপমাত্রায় এবং পুনরায় ২ মিনিট বরফে রাখা হয়। এতে পোষক (E. coli) রিকম্বিন্যান্ট DNA-কে শোষণ করে নেয়।

৪। জিন ক্লোনিংঃ রিকম্বিন্যান্ট DNAসহ পোষক (E. coli) ব্যাকটেরিয়াকে ফার্মেন্টেশন ট্যাংকের কালচার মিডিয়ামে জন্মানো হয়। E. coli ব্যাকটেরিয়ার সংখ্যা বৃদ্ধির সঙ্গে সঙ্গে রিকম্বিন্যান্ট DNA কপিও তৈরী হয়। ফলে β গ্যালাক্টোসাইডেজ A শৃঙ্খল এবং β গ্যালাক্টোসাইডেজ  B শৃঙ্খল  উৎপন্ন হয়। সেই সঙ্গে কিছু পরিমাণ মিথিওনিনও উৎপন্ন হয়।

৫। শৃঙ্খল দুটি পৃথকীকরণঃ কালচার মিডিয়াম থেকে পলিনিউক্লিওটাইডের A  শৃঙ্খল ও B শৃঙ্খল পৃথক করা হয়। এরপর সায়ানোজেন ব্রোমাইড প্রয়োগ করে A  শৃঙ্খল ও B শৃঙ্খলের সাথে উৎপন্ন মিথিওনিন অপসারণ করা হয়। অতঃপর রাসায়নিক উপায়ে শৃঙ্খল দুটি বিশুদ্ধ করা হয়।

৬। ইনসুলিন অণু তৈরীঃ সালফোনেটিং প্রক্রিয়ায় সোডিয়াম ডাইসালফোনেটিং ও সোডিয়াম সালফাইট এর উপস্থিতিতে নিউক্লিওটাইডের A শৃঙ্খল ও B শৃঙ্খল একত্রীকরণ করা হয়। অতঃপর ডাইসালফাইড বন্ধনী দ্বারা শৃঙ্খল দু’টি পুনঃসংযোজন করা হয়।

৭। ইনসুলিন বিশুদ্ধকরণঃ উৎপন্ন ইনসুলিনে ব্যাকটেরিয়ার নিজস্ব প্রোটিন থাকে। তাই আহরিত ইনসুলিনকে রাসায়নিক উপায়ে বিশুদ্ধ করা হয়।

৮। ইনসুলিন বাজার জাতকরণঃ বিশুদ্ধ ইনসুলিন উপযুক্ত এম্পুলে ভরা হয়। এরপর উহা বাজার জাত করা হয়।

১৯১৬ সালে স্যার এডওয়ার্ড শারপে শ্যাফার মানুষের অগ্ন্যাশয় থেকে ক্ষরিত ইনসুলিন আবিষ্কার করেন। ১৯২১ সালে কানাডিয়ান শারীরবিজ্ঞানী ব্যানটিং ও বেস্ট ইনসুলিনের ডায়াবেটিস প্রতিরোধী ভূমিকার কথা বর্ণনা করেন। ১৯২৩ সালে ইলি লিলি শুকর ও গরুর অগ্ন্যাশয় থেকে ইনসুলিন সংগ্রহ করে বাজারজাত করেন। ১৯৫৪ সালে ফ্রেডরিক স্যাঙ্গার মানব ইনসুলিনের অ্যামাইনো এসিড সিকুয়েন্স এবং রাসায়নিক গঠন আবিষ্কার করেন। ১৯৭৭ সালে ইটাকুরা (Itakura) এবং তাঁর সহকর্মীরা সর্বপ্রথম মানব ইনসুলিনের শৃঙ্খল দুটি সংশ্লেষণ করেন। ১৯৮০ সালে ডেনমার্কের Novo Industry শুকরের ইনসুলিনকে ৯৯% বিশুদ্ধ মানব ইনসুলিনে রুপান্তরিত করেন। ১৯৮১ সালে ক্যালিফোর্নিয়ার Hope National Medical Center-এর বিজ্ঞানীরা বিশুদ্ধ মানব ইনসুলিন উৎপাদন করে। ১৯৮২ সালে Eli Lilly হিউমুলিন নামক মানব ইনসুলিন বাণিজ্যিক ভাবে উৎপাদন করে। বর্তমানে জেনিনটেক, নভো ইন্ডাস্ট্রি, বায়োজেন, ইলি লিলি প্রভৃতি কোম্পানি বাণিজ্যিক ভাবে বিশুদ্ধ মানব ইনসুলিন বাজারজাত করছে।